瓷珠菌种保存管是实验室保存菌种的容器，保存管内有12颗表面凹孔小瓷珠用于细菌的吸附和保存，可在保存周期内使用12次（每次1个）。菌种保存管的取用和保存较为便利（取用复苏及保存菌株仅需1分钟）。

1.保存的菌种要求：

经过纯化后培养18-24h内的新鲜菌种，不宜使用老化或未经鉴定的菌种。对数期阶段的菌种，生命力最为顽强，能够更好的耐受保存过程中温度的变化。

2.菌种保存的浓度要求：

菌种保存浓度必须3-4麦氏比浊度，如接种浓度过低将会降低复苏效果。

a.平板菌落：保存的细菌一般要进行2-3次纯化，从而保证一个平板上的菌由单一菌落传代而来。在细菌保存的过程中，为保证制备的菌悬液达到3-4MCF，可以将整个平板的细菌全部刮到管中。如果平板长的比较满一般半个平板就够用,具体用量也根据菌种的不同有所差异。

b.液体培养纯菌：液体培养基能保证是纯菌的话，直接离心，弃掉上清，然后把保存管中液体吸进去充分混匀，然后再转移到菌种保存管中，整个过程要注意无菌操作。

一般菌种保存管最好选择平板菌落进行保存，因为液体培养基中有杂菌是不易观察出来的。 

3.操作要求：菌种保存时，操作上下颠倒混匀

上下颠倒，可使菌悬液充分混匀，重力作用下使菌株充分、均匀地吸附到小瓷珠上。旋摇不利于菌悬液充分混匀,反而会使菌株全部沉淀于管底。

4.操作要求：将管内的液体尽可能多的吸出 

吸出液体可避免反复冻融形成的冰晶对菌株的损伤，加快复苏的过程。因此，要尽可能的将与菌种混匀后的保存液吸净,减少在复苏的过程对菌株的伤害。

5.操作要求：菌种厌氧保存/复苏,提供厌氧环境

尽量在厌氧环境（厌氧舱）中开关，拧紧以后拿出，可以放在厌氧袋中冻存，或者小袋抽真空冻存。如没有条件也可以直接拧紧盖子后放在-80℃冻存（空气渗漏进去的可能性高一些）。 

6.操作要求：取用菌株时，要求快速 

菌种保存复苏原则：慢冻快融。要求快速,是因为在菌种复苏的过程中,长时间的溶解过程会对所保存的菌种造成损伤,瓷珠菌种保存方法最大程度的避免复苏造成的影响,但我们还是建议遵循菌种的保存复苏原则,保证所复苏菌种的复苏率。 

7.存放要求：菌种保存管在使用前保存 

菌种保存管采用特殊生产工艺,并对产品进行长期留样观察,以及稳定性试验,使用前-20℃/-80℃可存放1年，不会影响产品效果。 

8.存放要求：菌种保存管在使用后保存  

菌种保存管采用的是低温冷冻保存法。使用后放置低温环境（-80℃或液氮）中保存。保存管中的菌种在-80℃可保存1年。贮存在-80℃的低温中能减少冰晶形成，可极大降低冰晶形成对细菌的伤害，同时可为被保存的菌种创造更低的代谢环境，从而延长细菌保存的时间。

菌种保存成功的的关键点

1.细菌在适宜生长的环境中（需氧/厌氧/微需氧，35℃/25℃），会在极短时间内（8-18小时）经历：调整期-对数期-稳定期-衰退期，四个生长周期。取生命力最旺盛的对数期阶段的菌种，该阶段菌种生命力最为顽强，能够更好的耐受保存过程中温度的变化。

2.降低温度，使细菌进入“休眠状态”，使保存过程中该菌种处于最低的代谢活动。 

3.降低细菌在降温“休眠过程”和升温“复苏过程”中温度变化对菌种的伤害。

名词解释：

麦氏比浊法：细菌浓度测量的经典方法，核心原理是细菌溶于水后会形成与其浓度相应的浑浊度。该方法主要应用于微生物检测领域的细菌浓度检测、药敏实验前配置菌液时的大致浓度判断等。

被测培养物试管的浓度计算

0.5号麦氏浊度标准管约相当于1.5×10^8个细菌/ml；

1.0号麦氏浊度标准管约相当于3×10^8个细菌/ml；

细菌浓度标准管号×3×10^8=该管号的细菌数/ml；

麦氏比浊管的配比如下：

由于菌种保存管取用和保存便利，不仅可保存一般细菌，苛刻菌，以及霉菌、酵母菌等真菌也可在低温条件下通过菌种保存管保存，因此菌种保存管被广泛应用于临床领域（临床药敏试验 菌株的保存）、疾控领域（监测分离到的菌株的保存）、菌种保存中心（菌株的日常取用与保存）以及制药企业（阳性对照菌株保存和取用）等领域。